使用熒光顯微鏡要注意以下5點(diǎn)要求
更新時間:2020-07-22 點(diǎn)擊次數(shù):706
熒光顯微鏡是利用一個高發(fā)光效率的點(diǎn)光源,經(jīng)過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光(如紫外光3650入或紫藍(lán)光4200入)作為激發(fā)光、激發(fā)標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,再通過物鏡和目鏡的放大進(jìn)行觀察。這樣在強(qiáng)烈的對襯背景下,即使熒光很微弱也易辨認(rèn),敏感性高,主要用于細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能以及化學(xué)成分等的研究。熒光顯微鏡的基本構(gòu)造是由普通光學(xué)顯微鏡加上一些附件(如熒光光源、激發(fā)濾片、雙色束分離器和阻斷濾片等)的基礎(chǔ)上組成的。
熒光顯微鏡使用方法:
1.打開燈源,超高壓汞燈要預(yù)熱幾分鐘才能達(dá)到亮點(diǎn)。
2.透射式熒光顯微鏡需在燈源與聚光器之間裝上所要求的激發(fā)濾片,在物鏡的后面裝上相應(yīng)的阻斷濾片。落射式熒光顯微鏡需在光路的插槽中插入所要求的激發(fā)濾片/雙色束分離器/阻斷濾片的插塊。
3.用低倍鏡觀察,根據(jù)不同型號熒光顯微鏡的調(diào)節(jié)裝置,調(diào)整光源中心,使其位于整個照明光斑的中央。
4.放置標(biāo)本片,調(diào)焦后即可觀察。使用中應(yīng)注意:末裝濾光片不要用眼直接觀察,以免引起眼的損傷;用油鏡觀察標(biāo)本時,必須用無熒光的特殊油鏡;高壓汞燈關(guān)閉后不能立即重新打開,需經(jīng)5分鐘后才能再啟動,否則會不穩(wěn)定,影響汞燈壽命。
5.觀察在示教臺上的熒光顯微鏡下用藍(lán)紫光濾光片,可見經(jīng)o.01%的丫啶橙熒光染料染色的細(xì)胞,細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)被激發(fā)產(chǎn)生兩種不同顏色的熒光(暗綠色和橙紅色)。